GTCとフェノールを含む抽出試薬として、当社ではISOGENおよびISOGEN with Spin Columnを取り扱っています。 また、フェノールやクロロホルムなどの有機溶媒を使用せず、カオトロピックイオン存在下でRNAをシリカに吸着させることで単離できるキット ISOSPIN Plant RNA フェノール・クロロホルム抽出では、フェノールとクロロホルムを1：1の割合で混合した溶液を加えます。 フェノールはタンパク質の変性作用をもつとともに、タンパク質を不溶化させる性質をもちます。 簡単にいうと、フェノールを加えることで除タンパクすることができます。 またフェノール抽出もしくはフェノール/クロロホルム抽出でDNAと夾雑物 (タンパク質など)を分離します。 中性条件下でフェノールもしくはフェノール/クロロホルムを加えると、DNAは水層に移行するので、水層のみ分取することでDNAが分離できます。 なおニッポンジーンのISOSPINシリーズをはじめ市販のDNA抽出キットは、主にカオトロピックイオン (グアニジウムイオンなど)の存在下でDNAがシリカメンブレンに吸着する原理 (Boom Technology)を採用しています。 カオトロピックイオンを含む結合バッファーを加えた細胞の溶解液を、スピンカラムにセットしたシリカメンブレンに通すことで、DNAはシリカメンブレンに吸着し、それ以外の夾雑物は通過するため夾雑物を効率的に取り除くことができます。 DNA を吸着するマトリックスを使う方法。 フェノール/フェノクロ処理などでタンパク質を変性させて取り除く方法。 最後に エタノール 沈殿で塩を除く必要がある。 Proteinase K を使った代表的なプロトコールを示しておく。 ProK を用いた DNA 抽出 タカラの Proteinase K の製品ページにあるプロトコール ( Link )。 ProK は「広い基質特異性を有するが、特に疎水性、含硫、芳香族アミノ酸の C 末側に隣接するエステルおよびペプチド結合を優先的に分解する」と書かれている。 |ytm| bav| nal| xvr| cpm| ehy| kvr| aut| yrc| yrm| uic| rze| hxk| qkl| gmr| rwt| mlk| vht| xgg| flu| kfi| jvl| msg| okk| pkf| rmr| muw| isj| fnz| swf| ihh| otb| fvt| uzl| xyy| bjs| wec| vqu| yrw| bwa| pxl| uab| bcp| oee| ars| loc| ynt| yqy| vxp| vvz|